Застосування хромогенного методу до тесту на бактеріальні ендотоксини

Хромогенний метод є одним із трьох методів, які також включають техніку гель-згустку та турбідиметричну техніку для виявлення або кількісного визначення ендотоксинів грамнегативних бактерій за допомогою лізату амебоцитів, вилученого з блакитної крові підковоподібного краба (Limulus polyphemus або Tachypleus tridentatus).Його можна класифікувати як хромогенний аналіз кінцевої точки або кінетично-хромогенний аналіз на основі конкретного використовуваного принципу аналізу.

Принцип реакції такий: лізат амебоцитів містить каскад ферментів серинової протеази (проферментів), які можуть бути активовані бактеріальними ендотоксинами.Ендотоксини активують проферменти з утворенням активованих ферментів (називаються коагулазою), останній каталізує розщеплення безбарвного субстрату, вивільняючи жовтий продукт pNA.Вивільнену pNA можна виміряти фотометрично при 405 нм.І поглинання позитивно корелює з концентрацією ендотоксину, то концентрацію ендотоксину можна відповідно кількісно визначити.


Час публікації: 29 вересня 2019 р