Що таке тест на ендотоксини?
Ендотоксини - це гідрофобні молекули, які є частиною ліпополісахаридного комплексу, який утворює більшу частину зовнішньої мембрани грамнегативних бактерій.Вони вивільняються, коли бактерії гинуть і їх зовнішні мембрани розпадаються.Ендотоксини вважаються основними факторами, що сприяють пірогенній відповіді.А парентеральне введення продуктів, забруднених пірогенами, може призвести до розвитку лихоманки, індукції запальної реакції, шоку, органної недостатності та смерті людини.
Ендотоксиновий тест — це тест для виявлення або кількісного визначення ендотоксинів грамнегативних бактерій.
Спочатку для виявлення та кількісного визначення ендотоксинів у фармацевтичних продуктах використовують кроликів.Відповідно до USP, RPT передбачає моніторинг підвищення температури або лихоманки після внутрішньовенної ін’єкції фармацевтичного препарату кроликам.І 21 CFR 610.13(b) вимагає проведення пірогенного тесту на кроликах для певних біологічних продуктів.
У 1960-х роках Фредрік Бенг і Джек Левін виявили, що амебоцити підковоподібного краба згортаються в присутності ендотоксинів.TheLimulus Amebocyte Lysate(або Tachypleus Amebocyte Lysate) було розроблено відповідно для заміни більшості RPT.У USP тест LAL називається тестом на бактеріальний ендотоксин (BET).І BET можна зробити за допомогою 3 методик: 1) техніка гель-згусток;2) турбідиметрична методика;3) хромогенна методика.Вимоги до тесту LAL включають оптимальний pH, іонну силу, температуру та час інкубації.
У порівнянні з RPT, BET швидкий і ефективний.Однак BET не міг повністю замінити RPT.Оскільки на аналіз LAL можуть впливати фактори, і він не може виявити неендотоксинові пірогени.
Час публікації: 29 грудня 2018 р
